NADC34或将成为中国感染率最高的蓝耳毒株

NADC34即将成为中国感染率最高的蓝耳毒株

最近网络上NADC34这个名词出现的概率很高，于是编者查阅了一些文献，了解到该毒株最早在美国发现，后来传入中国，目前与国内的其他蓝耳毒株发生了重组；NADC34在中国的感染率逐年飙升，大有与NADC30、HP-PRRSV三分天下之势；该毒株目前主要流行于北方省份，南方省份尚未报道；该毒株导致母猪流产和仔猪死亡，母猪流产率在0-25%不等，仔猪死亡率10-80%不等，并发现NADC34与3系毒株QYYZ发生了重组，仔猪致死率在40%（2/5）；对于产房仔猪蓝耳检测，睾丸液相比血清、断尾液、乳房擦拭物，阳性率更高。以下为详细报道。

一、NADC34的命名

所谓NADC，全称是National Animal Disease Center，是指美国农业部下属的国家动物疫病中心，该机构将分离到的PRRS毒株按照时间顺序进行命名，NADC+序号，大家所熟知的NADC30即来源于此。2013-2015 年，NADC34-like PRRSV 在美国爆发流行，2017年，中国首次报道于，辽宁省检测到NADC34-like PRRSV。

二、NADC34毒株的特征

类NADC34样在VR2332 NSP2蛋白对应的328-427位中有100aa的缺失。如下图1所示中红色方框，前10株为中国分离的类NADC34，IA/2014/NADC34和NADC30毒株为美国报道，JXA1和VR2332为高致病性PRRSV和经典PRRSV的代表毒株。

NADC34缺失氨基酸

图1：中国NADC34在NSP2上100个氨基酸缺失

三、NADC34近年的检出率飙升至28.6%

Xu H^[1]对中国类NADC34 PRRSV的流行情况进行监测，结果显示近年来类NADC34 PRRSV检出比例持续增加，2017-2019年，这类毒株的阳性占比不到3%，2020年飙升至11.5%，2021年达到惊人的28.6%，已经与NADC30-like（35.4%）和HP-PRRSV（31.2%）一同成为我国部分地区的主要流行毒株之一。下图红色代表NADC34、黄色代表NADC30、绿色代表高致病性蓝耳。

图2：NADC34毒株2017-2021的阳性率和数量

目前已分离出NADC34毒株的省份有黑龙江、河南、山东、河北、吉林、江苏、辽宁，主要集中在北方，因此南方省份需要密切关注该毒株的流行趋势。

四、NADC34与其他毒株重组后致病性

4.1NADC34与不同PRRSV毒株重组后致病性

Hongyan Bao^[2]等在文章《Emergence and spread of NADC34-like PRRSV in China》综合多篇NADC34文献报道，对发生重组的NADC34在猪场的临床症状进行总结，不同重组导致的损失率不同，母猪流产率在0-25%不等，仔猪死亡率10-80%不等，其中来源于黑龙江命名为PRRSV-ZDXYL-China-2018-2的毒株，能导致80%的仔猪死亡。不同NADC34之间的致病性差异可能归因于与不同PRRSV毒株的重组模式的不同。到目前为止，还没有关于NADC34在母猪和母猪中的实验感染的报道。如下图3所示。

图3：中国类NADC34的报道综述

4.2 NADC34与3系毒株QYYZ-like重组后的致病性

Ying-Feng Sun等^[3]于2021年从中国天津市某猪场仔猪中分离出一种发病率（75%）和死亡率（40%）的PRRSV毒株TJnh2021。分析显示，TJnh2021高度同源于NADC34-like的ORF1ab-ORF2和ORF6-ORF7编码区，以及QYYZ-like的ORF3-ORF5，暗示存在自然重组事件。重组分析显示，重组事件发生在1.5和3之间的两个谱系间ORF2(nt12196)和ORF5(nt13628)的两个断点(参考VR-2332菌株)。动物实验表明，与中国报道的其他类NADC34相比，TJnh2021致仔猪死亡率为40%，具有更高的致病性。综上所述，类NADC34与中国毒株进行了基因重组。

注：QYYZ毒株是华南地区感染率较高的一种蓝耳毒株，可能来源于台湾省。

图4：TJnh2021与具有代表性的猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)谱系的重组特征。

（图解：纵坐标为相似度，红色波浪线代表NADC34、蓝色波浪线代表QYYZ。图中TJnh2021毒株与红色波浪线高度同源，但在两条红线分别位于ORF2(nt12196)和ORF5(nt13628)，蓝色波浪线突然升高，说明在这个阶段出现了NADC34与QYYZ的重组。）

重组毒株TJnh2021感染仔猪后致死率40%(2/5)

TJnh2021接种组仔猪直肠温度从感染后3天开始出现发热(下图a），并表现出明显的临床症状，包括咳嗽、厌食、体耳红色变色。在TJnh2021接种组中，5头仔猪中有2头在10和12天时死亡(下图b)。所有感染仔猪在3、7、10天时采集的血清样本均为PRRSV阳性。对照组仔猪PRRSV仍呈阴性，整个实验过程中无明显临床体征。

图5：仔猪接种TJnh2021后直肠温度和死亡率

注：华南区域感染类QYYZ毒株的比例很高，一旦猪场引入NADC34毒株，该毒株与猪场流行毒株重组，仔猪致死率可能达到40%。

五、猪场NADC30、NADC34混合感染后的仔猪死亡

Chao Li ^[4]从2020年至2021年对中国黑龙江省一个多种PRRSV共存的育肥猪场持续监测病，在150天内的发病期内，共有412/3400头猪死亡，死亡率为12.12%，对病原的持续监测显示，NADC30、NADC34是该场的优势毒株；在猪发病死亡高峰期，NADC34的检出率也达到了高峰期，如下图6所示红色方框。以上结果表明，NADC30和NADC34与该猪场猪仔的死亡密切相关，而非高致病性蓝耳毒株。

图6：死猪数量和病毒亚型的统计

六、蓝耳病毒在睾丸液中阳性率高

Carles Vilalta^[5]等试图通过评估血清、睾丸液、断尾液、母猪乳房擦拭物等样本的蓝耳载量，来准确地确定一窝产仔的PRRSV状态，结果显示：睾丸液比其他样本具有更高的检出率，如下图7所示（图片经过编者翻译）：最有意思的是10号母猪，其子代母猪和公猪血清检测均为阴性，但睾丸液阳性、断尾液阴性、乳房擦拭物阴性。该结果证明睾丸液是检测仔猪蓝耳感染的理想样本。

图7：PRRSV 在不同样本中的RT-PCR检测结果

七、小结

1.NADC34有替代NADC30成为中国感染率最高蓝耳毒株的趋势；

2.NADC34目前在北方省份流行，南方省份尚未有报道，南方省份要密切关注该毒株的流行趋势；

3.NADC34毒株与不同蓝耳的重组导致的损失不同，其中与3系QYYZ毒株的重组导致仔猪致死率为40%，华南地区广泛流行QYYZ毒株，因此需要严密防控NADC34毒株进入猪场发生重组；

4.随着NADC30样PRRSV在我国的发展，未来NADC34PRRSV可能与国内PRRSV菌株发生重组，这可能导致更广泛的地理分布，对我国养猪业构成更严重的威胁。

5.猪场检测PRRSV，可以采集睾丸样本。

参考文献：

[1] Xu H, Li C, Li W,et al. Novel characteristics of Chinese NADC34-like PRRSV during 2020-2021[J]. Transbound Emerg Dis. 2022 Feb 19. 

[2] Bao H , Li X . Emergence and spread of NADC34-like PRRSV in China[J]. Transboundary and Emerging Diseases, 2021.

[3] Sun YF, Liu Y, Yang J, et al. Recombination between NADC34-like and QYYZ-like strain of porcine reproductive and respiratory syndrome virus with high pathogenicity for piglets in China[J]. Transbound Emerg Dis. 2022 Feb 4.

[4] Li C, Gong B, Sun Q, et al. First Detection of NADC34-like PRRSV as a Main Epidemic Strain on a Large Farm in China[J]. Pathogens. 2021 Dec 29;11(1):32

[5] Cva B ,  Jmsa C ,  Ms D , et al. Assessing the litter level agreement of RT-PCR results for porcine reproductive and respiratory syndrome virus in testicles, tails and udder wipes diagnostic samples relative to serum from piglets - ScienceDirect[J]. Preventive Veterinary Medicine, 2020, 186.