哼哼会评 | 华中农业大学 李文涛 教授《猪流行性腹泻诊断技术》的汇报（2021年6月25日）

2021年6月25日，在2021第三届国际兽医检测诊断大会，会前会上，国内外的专家学者就流行性腹泻、非洲猪瘟、猪瘟、丁型冠状病毒等病原的诊断与防控进行了精彩的分享，本文主要就华中农业大学 李文涛教授 分享的《猪流行性腹泻诊断技术》所提及的重要内容做出分享。

1.猪流行性腹泻的传播途径是非常复杂的，存在跨国传播和国境内传播的问题。这导致了新毒株不断出现的问题，给PEDV的防控带来了挑战。

2.PEDV为单股正链RNA病毒，它的基因组复制的不保守性，决定了它的遗传复制上存在大量的突变。

3.实验室对PEDV分子流行病学分析发现，PEDV流行以变异毒株为主，经典毒株与变异毒株共存的局面。

4.通过对疫苗免疫后的跟踪发现，疫苗的免疫并不能对仔猪提供非常好的保护性。

5.PEDV的主要的中和表位是S蛋白。通过中和抗体表位的鉴定发现，变异毒株、疫苗毒株和弱毒株三者的抗原表位反应存在明显差异，说明不同毒株S蛋白的中和抗体表位差异是非常大的。

6.S蛋白的抗原表位的差异表明，目前国内疫苗毒株和流行毒株之间是不匹配的。猪场使用疫苗前，推荐对疫苗和猪场毒株的基因序列进行测序，看是否匹配。

7.作者所在实验室对2011年~2018年临床PEDV、TGEV、PoRV检出率统计数据如下图所示。2016年以前PEDV检出率超过了50%，2017年和2018年PEDV检出率分别为26.2%和32.4%，可能跟变异毒株疫苗的投入使用有关。TGEV的检出率一直比较低。PoRV的检出率呈现增加的趋势。

8.通过对发病猪群类型统计来看，产房仔猪发病的比例是最高的。保育、育肥猪、后备猪和产房母猪的检出率也比较高。公猪精液有一定的检出率，但病毒到底以何种方式进入公猪精液，值得深入研究。媒介（饲养员、车辆等）的阳性率，提示PEDV通过环境传播的风险是非常高的，需要对猪场生物安全进行加强。

9.通过对中国405株PEDV的S基因进行分析发现：S基因变异主要发生在1-750bp位置，同时有新的毒株（PEDV-LS、CH/HMG/BT）在1-550bp和850-1100bp存在新的变异。

10.PEDV的临床诊断方法：

10.1临床观察：出现典型的腹泻症状。

10.2病毒的分离与鉴定：

10.3病原的核酸检测：课件提供了PEDV经典毒株与变异毒株鉴别诊断的RT-PCR检测引物。

10.4基于单抗的免疫荧光技术。

10.5宏基因组测序技术：

10.6母乳中IgA抗体水平的监测：这是评价母猪疫苗免疫效果和提供给仔猪的保护性效果的一个重要评价指标。

10.7 其他的一些检测方法：

总结：目前针对PEDV检测的方法非常多，临床适合猪场快速检测评估的方法主要有2种：

A、抗体检测：主要是对母猪初乳中的IgA的进行检测，评估初乳中的抗体是否能给仔猪提供坚强的保护力。

B、病原核酸检测：由于非瘟对行业检测的推动，目前一线猪场都配备有荧光定量PCR检测实验室，均具备核酸检测的能力。猪场实验室可以采购腹泻相关的荧光定量PCR检测试剂盒，对疑似病例及时采样检测，对环境媒介及猪群定期采样进行检测，对后备猪群引种进行检测，从而降低腹泻相关疾病对猪场造成的损失，最终起到降本增效的目的。